O principio básico da síntese de ADN

A síntese química de ADN baséase na estratexia de síntese en fase sólida e na química das fosforamiditas.A diferenza da síntese biolóxica de ADN, o material na síntese química de ADN é DMT (4,4-dimetoxitritil) e desoxirriboxisido modificado con fosforamidita, como se mostra na Figura 1. A síntese de ADN realízase no soporte sólido (podemos ofrecer varios deColumna de síntese de oligo), é dicir, CPG (vidrio de poros controlados) e PS (poliestireno), e toda a síntese realízase nunSintetizador de ADN/ARN, que é o noso principal equipo, ten diferentes modelos como: HY Single Channel Synthesizer, HY-12, HY-192 etc., a dirección de síntese é de 3' a 5', e un nucleótido introdúcese no soporte sólido a través dun ciclo de síntese.Un ciclo de síntese típicamente contén catro pasos, Desprotección, Acoplamento, Capado e Oxidación (Figura 2).A Desprotección está configurada para eliminar o grupo DMT do soporte sólido ou o grupo hidroxilo 5' do nucleósido anterior, o ácido tricloroacético ao 3% en diclorometano úsase como reactivo de desprotección.A continuación, o desoxirriboxiside modificado con fosforamidita deixouse expoñer ao grupo hidroxilo coa axuda do activador, é dicir, 5-etiltiotetrazol ou 4,5-dicianoimidazol, formando o fosfitetriéster (III), e realizouse o paso de Acoplamento.Realízase unha etapa de captación para bloquear o grupo hidroxilo non reaccionado durante a etapa de acoplamento, para minimizar a formación de secuencias de defectos non desexadas.Finalmente, o fosfitriéster inestable (III) oxídase a fosfortriéster químico estable (V) co iodo como oxidante na presenza de piridina.

O ADN sintetizado podería ser escindido do soporte sólido mediante aminólise, o grupo protexido 2-cianoetilo no fosfortriéster e a amida na nucleobase é escindida ao mesmo tempo, as placas de síntese e as columnas de síntese en bastidores colócanse directamente na cámara de reacción. daEquipos de desprotección.O ADN bruto pódese preparar mediante HPLC, electroforese e OPC baixo demanda, tamén podemos proporcionarche oEquipos de purificaciónpara o Postprocesamento.